细胞工程考研复习最终整理精编版(4)

本站小编 免费考研网/2016-08-16


九.植物细胞培养生产有价值代谢产物优点:1 不受季节环境病虫害影响。2 不占耕地,适用于贫瘠的地方,3 代谢产物生产可以在可控条件下进行,可以通过细胞株筛选,特定生物转化途径与代谢调控提高目标产物含量。
十.工业化生产的细胞株必须满足的条件:1 分散性好,适合大规模悬浮培养。2 均一性好,细胞大小,生理状态一直。3 生长速度快,培养周期短,不易染菌。4 目标产物含量高,容易分离提取。5细胞遗传稳定。
十一.动物细胞培养是很多的支撑技术:1 为新型药物筛选与研究提供细胞筛选模型,2 为细胞组成,结构与生物功能研究以及细胞重组,细胞融合,基因重组提供细胞材料。3 为组织工程体外构建人造组织,器官提供种子细胞。4 为胚胎工程,克隆动物培育提供支撑技术。
十二.动物细胞的特点:1 动物细胞比微生物细胞大,无细胞壁,对机械搅拌或剪切力敏感。2 动物细胞生长缓慢,易受污染。3 正常细胞培养的世代数有限,只有癌细胞和发生转化的细胞才能无限生长下去。4动物细胞间主要以聚集体形式存在,大多需要贴附在载体表面生长。





十三.体外生长的动物细胞一般具有贴附,细胞接触性抑制,密度抑制的特点。贴附性细胞主要有四类
1 成纤维型细胞:细胞贴壁后呈长梭形,圆形细胞核位于中央,生长呈放射状,旋涡状走向。细胞之间排列疏散,有较大的细胞间隙。
2 上皮型细胞:细胞贴壁后呈三角形及不规则扁平的多角形,中央有扁圆形核,细胞彼次紧密连接。
3 游走型细胞:细胞在支持物上分散生长,一般不连接成片形成菌落,呈活跃的游走和变形运动,速度快且方向不固定,外形不规则且不断变化。
4 多形型细胞:形态上不规则,一般分胞体和胞突两部分,其中胞突为细长型,类似丝状伪足,胞体呈现多角形。
十四.动物细胞灌流式培养优点:1 细胞截流在反应器内,可以维持较高的细胞密度,从而提高了产品的产量。2 反应速率容易控制,培养周期较长,可提高生产率,目标产品回收率高3 细胞稳定地处在较好的营养环境中,可以去除氨,乳酸,甲基乙二醛等有害代谢物质,减少细胞凋亡。4 可连续性收获产品。
十五.转基因动物乳腺生物反应器生产的优势:1 动物乳腺组织有能力对表达的蛋白进行大规模复杂而转一的翻译后修饰,并且可正确折叠为有功能的构象,所以生产出的药用蛋白与天然蛋白质的活性一致。2 动物乳腺不仅能大量,持续地表达蛋白质,可维持所表达蛋白质的稳定性,而且可通过诱导系统调控表达。3 比细胞生产药用蛋白的成本低,同时由于药物蛋白来源于对人体完全无害的动物乳汁,无毒副作用,安全可靠。4药物分离纯化工艺简便。
十六.体外胚胎干细胞诱导分化的优点:1 胚胎干细胞在体外可被诱导分化为各种功能细胞。2 胚胎干细胞结合基因改造有可能在特定的体外培养与筛选条件下,诱导成单一类型具有功能性的体细胞,作为特定细胞移植的材料。3体外培养系统能够定性和定量地分析某些细胞因子,细胞外基质和诱导剂等因素对胚胎干细胞生长和分化的影响。4 在不改变胚胎干细胞全能型和胚胎干细胞胚胎发育的前提下,通过外源基因导入或剔除内源基因和突变等基因工程途径研究某些基因在胚胎发育中的功能和制备嵌合体动物。
胚胎干细胞研究存在的问题:1来源限制:人类胚胎干细胞研究存在细胞来源限制问题。2体外培养困难。3安全性:自发分化是多向的,干细胞移植后的成瘤性风险比较大。4伦理道德问题。
十七.与胚胎干细胞相比成体干细胞优点:1 来源方便,可以从自身获得。2 没有伦理学问题:成体干细胞来自成熟个体,获得成体干细胞不会损伤供体,可以避免胚胎干细胞研究带来的伦理学问题。3 避免免疫排斥反应:同种异体胚胎干细胞及其分化细胞用于临床会引起免疫排斥。4 比较安全:虽然胚胎干细胞分化成各种细胞类型,但目前还不能完全控制胚胎干细胞的定向分化,容易导致畸胎瘤。
十八.成体干细胞存在问题:1 由于成体干细胞在组织中含量极少,又缺乏特异性检测标志,因此很难从组织中分离纯化出来。2 成体干细胞的可塑性可能是混杂的几种或一群不同类型的干细胞分化的结果。3 还有待建立有效的使成体干细胞在体外增殖而又能维持未分化状态的技术。4 成体干细胞体外长期传代后会发生表型的改变,且成体干细胞也参与肿瘤的形成。
植物细胞分化与脱分化:极性现象:使细胞或器官的一端与另一端之间显示出结构和生理生化上的差别。细胞不均等分裂:细胞内极性的建立引起不平均分裂。位置效应:分化存在的区域分生活跃位点显示不亲和性,以建立和保持一定的形式。植物激素作用:其与植物分化有密切的关系。细胞分化的调控机制:生长素主要调节基因表达的转录水平上,而不是翻译水平。愈伤组织:脱分化后的细胞经分裂,产生无组织结构、无明显极性的松散细胞团。
十九:培养基成分:无机盐、有机物、调节物质(植物激素、生长素、细胞分裂素、赤霉素)、其他添加物:(1)加入丙酮或者三羧酸循环中间产物如柠檬酸、琥珀酸、苹果酸能够保证植物细胞在以铵盐作为单一氮源的培养基上生长,耐受钾盐的能力也会提高,还可以促进低密度接种的细胞和原生质体的生长。
       (2)复合物质通常作为细胞的生长调节剂,如酵母提取液、麦芽提取液。
       (3)添加抗生素可防治细菌或真菌污染。
       (4)在固体或半固体培养时需要添加琼脂,使培养物位于表面。添加量一般为百分之0.6至百分之1。
       (5)活性炭可以吸附培养过程中产生的有害物质,添加量一般在百分之5左右。
二十:植物转基因技术转化方法:(1)载体介导法:将目的基因插入到农杆菌的质粒或病毒的DNA分子上,随着质粒或病毒DNA的转移进入受体。(2)基因直接导入法:通过物理或化学方法直接将外源目的基因导入植物细胞。物理方法:点击法、基因枪法、超声法、显微注射法等;化学方法:PEG法、脂质法。(3)种质系统法:在植物授粉后,将外源DNA注入子房的胎座位置,使DNA沿花粉管通道进入胚囊与受精卵或胚细胞接触。(4)病毒感染法:病毒可以感染植物组织,不仅双子叶和单子叶限制,因此病毒DNA可以作为载体转化植物细胞。

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