转基因技术：通过人工方式将外源g整合到生物体g组内，并使该g生物能稳定地将此g遗传给后代的技术。







一．细胞培养的操作方式及其特点
1).分批式培养：细胞和培养基一次性加入到培养容器或生物反应器内经行培养，培养过程中培养液体积不变，不添加营养成分，代细胞增长和积累到适当时间，一次性收获细胞，产物和培养液的方法。
分批式培养的特点：（1）操作简单，培养周期短。培养系统属于封闭式，培养过程与外部环境没有物料交换，染菌和细胞变异概率低。除了控制温度,PH和通气量或搅拌速度外，不进行其他任何控制。2 直观反映细胞代谢过程。因培养期间不加任何营养成分，细胞生长代谢是在一个相对固定的环境中，适合研究营养消耗,细胞生长,代谢产物积累规律。3 可直接放大。由于培养过程简单，对设备和控制的要求较低，规模放大比较容易。
2).流加式培养：再分批培养过程中，间歇或连续地不加一种或多种营养成分的培养方法。
流加式培养优点： 1 可根据细胞生长速率, 营养物消耗情况，保证合理充足的营养。2 以减少产物反馈抑制，排除有害代谢产物积累带来的细胞损伤，细胞不易老化。3 可以避免在分批培养基中因一次投料过多造成的底物抑制等影响，改善培养液流体学性质。4 可延长指数生长期，从而提高细胞浓度，延长细胞培养周期。产物浓度较高，同时又能实现连续收获。
3).半连续式培养：又称重复分批式培养或换液培养。在细胞增长和产物形成过程中，每间断一段时间从中取出部分培养液或者细胞，剩余的细胞作为种子，在用新的培养液补足到原有体积，是生物反应器内的总体积不变
半连续式培养的特点：1 细胞可持续指数生长，并可保持产物和细胞在一较高的浓度水平，培养过程可延续很长时间。2 可进行多次收获。3 操作简单，生产效率高。
4).连续式培养：在细胞达最大密度之前，以一定的速度向生物反应器连续添加新鲜培养基，同时含有细胞的培养液以相同的速度连续从生物反应器流出，以保持培养基体积恒定的培养方式。
连续式培养的特点：1细胞能在近似恒定状态下生长，营养物质浓度,产物浓度，PH基本可保持恒定，细胞浓度比生长速率可基本维持不变，细胞维持持续指数增长。稳定状态可有效地延长培养中的对数生长期。
存在的问题：1一直有细胞收获，浓度一般不高。2细胞分列快，易变异。3由于是开放式操作，加上培养周期较长，容易造成污染。4对设备仪器的控制技术要求较高。
5).灌流式培养：把细胞和培养基一起加入生物反应器中，在细胞增长和产物形成过程中，不断地将部分培养液取出，同时又连续不断的补充新的培养液。
灌流式培养特点：1 细胞截流系统可使细胞保留在生物反应器内，维持较高的细胞密度。2 连续灌流系统能使细胞处在较稳定的营养环境中，有害代谢废物浓度积累较低。3 反应速率容易控制，培养周期较长，可提高生产率，目标产品回收率高。4 产品在生物反应器内停留时间短，可及时回收，有利于保持产品的活性。
二．植物组织培养：是将植物器官，组织，细胞或原生质体等外植体材料无菌条件下培养在人工培养基上，在适当条件下诱发长成完整植株的一种技术。
植物组织（离体）培养优点：1 周期短，便于人工控制培养条件。繁殖速度快，经济效益高。2 占用空间小，不受地区，季节限制。3 繁殖珍稀，濒危苗木和突变体，是优良品种培育的有效途径。4 利于保持原来品种特性。
三．植物胚胎培养：对植物的胚及胚器官进行人工离体培养，使其发育成幼苗的技术。
植物胚胎培养意义：1 克服杂交胚的败育，获得稀有杂种。2 获得单倍体和多倍体植株。3 打破种子休眠，促进胚萌芽。4 快速繁殖良种，缩短育种周期。5 克服种子力低下和自然不育性，提高种子发芽率。6 提高后代抗性，改良品质。7 用于种子活力的快速测定。8 用于种质资源的搜集和保存。9 研究胚胎发育的过程和控制机制。

四．试管动物：即体外受精动物，是指将供体的精子和卵子在体外受精，体外培养胚胎发育到一定阶段，通过胚胎移植移入受体完成发育出的动物。
试管动物培育步骤：1 精子采集与体外获能，卵子采集与成熟培养。2 体外受精。3 重组胚激活与体外培养。4 胚胎移植。5 体内发育，出生
五．植物组织培养结合诱变育种的关键问题： 1 选择合理的受体与部位。2 选择适宜的处理剂和剂量。3 采用正确的筛选方法。
植物细胞培养：在离体条件下，将分离的植物细胞通过继代培养增殖，大量细胞群体的一种技术。
六．植物细胞培养特点：1 植物细胞直径一般为10~200微米，平均直径比微生物细胞大30~100倍。2 植物细胞很少以单一细胞形式悬浮生长，通常以一定细胞数的非均相细胞团方式存在。3 植物细胞具有纤维素细胞壁和大的液泡，很容易被剪切力损伤。4与微生物细胞相比，植物细胞生长速度慢，操作周期长，分批培养一般需要2~3周，半连续或连续培养时间一般长达2~3个月。5 植物培养基成分丰富而复杂，适合微生物生长，因此防止污染更困难。6 植物细胞培养一般需要光照，通过光合作用合成有机物，因此氧气和二氧化碳的含量与传递对细胞培养影响较大。
植物离体受精在新品种培育中的意义：理论方面，对受精的生理生化机制及早期胚胎发育的研究具有理论意义，应用方面，可以越过花粉—柱头识别障碍，克服远缘杂交不亲和性或自交不亲和性，并在转基因植物培育方面具有独特优势。
七．悬浮培养优点：1可以增加细胞与培养液的接触，促进营养的吸收。2 保持良好的混合状态，从而获得良好的气体传递效果。3 可以达到较高的细胞浓度，容易放大培养。
八．植物固定化培养优势：1 细胞经包埋后使所受的剪切力损伤减小，维持了细胞的稳定性，适合脆弱的植物细胞的培养，同时也利于采用传统生物反应器大规模培养。2 悬浮细胞培养体系中细胞密度比较高时会因黏度增加引起传质困难。固定化细胞培养系统中细胞密度远高于悬浮培养，但并不会改变培养液流体性质，利于传质。3 大多数植物次级代谢产物在细胞生长停滞后大量合成。采用固定化培养可以将细胞生长和产物合成两个阶段分开、4 细胞生长较为缓慢，有利于次级代谢产物的积累。5 固定化增加了细胞与细胞间的接触，促进了细胞间信息传递，有利于代谢产物的合成。6 固定化细胞可以反复利用，可以方便地进行产物的连续性收获，降低成本。