华中农业大学分子生物学课程考试试卷（答案）
一、名词解释
1．Silent mutation：没有明显性状改变的突变。是中性突变中的一种特殊情况。即在基因中碱基对发生替换，改变了mRNA的密码子，结果蛋白质中相应位点是发生了相同氨基酸的取代，由于氨基酸的序列末发生变化，所以蛋白质仍具有野生型的功能，实际上就是同义突变。
2．Back mutation：回复突变是指突变体的表现型回复为野生状态的突变。正向突变改变了野生型性状，突变体所失去的野生型性状可以通过第二次突变得到恢复，这种第二次突变就叫做恢复突变。
3．Attenuator：一个受到翻译控制的转录中止子结构。由于翻译作用的影响，其后面的基因或者被转录，或者在衰减子处实现转录的中止即产生衰减作用。
4．Insulator：能阻断激活或失活效应的元件。可在增强子和启动子之间阻断增强子的激活作用，也可防止异染色质的扩增，引起基因表达。
5．Inverted repeat：反向重复。方向相反的两端重复序列。
6．Negative superhelix of DNA:原来的绳子的两股以右旋方向缠绕，如果在绳子一端向松缠方向捻转，再将绳子两端连接起来，则会产生一个右旋的超螺旋以解除外加的捻转所造成的胁变。这样的DNA螺旋叫做负超螺旋。
7．Chi sequence：DNA分子上的同源重组热点序列5GCTGGTGG3，由RecBCD特异识别。
8．TILLING：Targeting Induced Local Lesions In Genome,即定向诱导基因组局部突变。指以筛选突变基因为主的反向遗传学研究。
9．Silencer：一种通过一段延伸的DNA区域影响染色质结构，从而调节转录关闭的DNA元件。
10．Pseudo allele：染色体上功能相同，控制同一性状的非全同等位基因，它们紧密连锁，交换率极低。
11.  Ap位点：所有细胞中都带有不同类型、能识别受损核酸位点的糖苷水解酶，它能够特异性切除受损核苷酸上的N-β-糖苷键，在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶位点，统称为AP位点.

二、说明下列现象的分子生物学原理：
1．答：AARS是氨酰－tRNA合成酶，它能保证氨基酸与tRNA的准确结合。
a)    氨基酸tRNA合成酶对氨基酸的特异识别与结合，氨基酸结合位点对结构相似的氨基酸有双筛作用，无相似结构的氨基酸间，其特异AARS无双筛作用。
b)    tRNA中决定负载特定氨基酸的空间密码——负密码子
能保证tRNA与AARS的tRNA结合位点的特异基团间的分子契合。
2．答：RNAi是外源或内源性的双链RNA    进入细胞后引起与其同源的mRNA特异性降解.dsRNA进入细胞后，在Dicer作用下，分解为21－22bp的SiRNA. SiRNA结合相关酶，形成RNA介导的沉默复合物RISC. RISC在ATP作用下，将双链Si RNA变成单链SiRNA,进而成为有活性的RISC,又称为slicer.slicer与靶mRNA结合，导致其断裂，进而导致其彻底降解。
       反义RNA是与靶mRNA互补的RNA，它通过与靶mRNA特异结合而抑制其翻译表达，反义RNA是与靶mRNA是随机碰撞并通过碱基互补配对，所以，mRNA不一定完全被抑制。
3．答：这两种调控方式是长期自然选择的结果，也是生物体采用的经济有效的原则选择的。原核生物基因组小，基因少而简单，生命繁殖快，多采用负控制的保险机制，即使调节蛋白质失活，酶系统照样合成，只不过有时浪费一点罢了，绝不会使细胞因缺乏该酶系统而造成致命的后果。另外，采用负控制具有一开俱开，一关俱关的特点，减少不必要的环节；而真核生物基因组大，基因多且复杂，采用正控制具有更大的优越性，转录因子相互作用缺一不可，可以保证真核生物基因表达调控的严谨性和灵活性以及经济性原则。
4．答:真核生物的转录因子可以分为两部分，Binding Domain和Activated Domain。Binding Domain负责结合在DNA上，Activated Domain负责激活转录。二者都是相互独立的区域，但二者单独时都不能有转录活性，必须结合在一起或相互靠近在一起才有活性。
      在研究蛋白质相互作用中，将一种蛋白质的基因连接在Binding Domain上，将另一种蛋白质的基因结合在Binding Domain上，蛋白质基因表达后就与转录因子的两个Domain分别结合，两个蛋白质因相互作用而结合在一起，进而使Binding Domain和Activated Domain相互靠近在一起，从而形成具有转录活性的转录因子。在欲表达的基因区域连上报告基因，通过报告基因的表达与否，就可判断蛋白质之间是否发生了相互作用。

三、详细回答下列问题
1．答：
DNA结构如下：
GC CAAT TATA  I  leading  ATG signal exon1 intron1 exon2 intron2 exon3 TAG  AATAAA
 岛  box  box  site  seq.        seq.                               TAA  脱尾序列
                                                                 TGA
hnRNA结构如下：

leading  AUG signal exon1 intron1 exon2 intron2 exon3 UAG  AAUAAA
seq.          seq.                              UAA  脱尾序列
                                              UGA