细胞工程期末复习（必考）

细胞工程：研究真核细胞的核—质关系以及细胞器、细胞质基因转移的技术。

组织工程：研究开发用于修复或改善人体病损组织或器官的结构、功能的生物活性替代物的一门科学。

染色体工程：是按照一定的设计，有计划的消减添加或替换同种或异种染色体从而达到定向改变遗传特性和选育新品种的一种技术。

细胞连接：使细胞间的联系结构。细胞表面的特化结构或特化区域，是细胞间建立长期组织上联系的结构基础。涉及细胞外基质蛋白、跨膜蛋白、胞质溶胶蛋白、细胞骨架蛋白等。

细胞全能性：指分化细胞保留着全部的核基因组，具有生物个体成长、发育所需要的全部遗传信息，具有发育成完整个体的潜能。

细胞分化：指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程。包括时间和空间上的分化。

脱分化：又称去分化，指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程。即分化的细胞在适当条件下转变为胚性状态而重新获得分裂能力的过程。

再分化：是指在离体条件下，无序生长的脱分化细胞在适当条件下重新进入有序生长和分化状态的过程。

细胞培养：指从体内组织分离细胞，模拟体内环境，在无菌适当的条件使其生长繁殖的技术。

人工种子：又称合成种子或体细胞种子，指将植物离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成的类似种子的颗粒。

植物胚胎培养：指对植物的胚及胚器官进行人工离体无菌培养，使其发育成幼苗的技术。

试管受精：指在无菌条件下离体培养未受精子房或胚珠和花粉萌发产生的花粉管进入胚珠从而完成受精过程。

细胞核移植：一种利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术。

体外受精：指使哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。

胚胎移植:指将受精卵或发育到一定阶段的胚胎移植到与供体同时发情排卵但为配种的受体母畜输卵管或子宫的技术。

人工受精：指将采集的精子注入人发情处理的母体内完成受精过程。

试管婴儿：指将卵子与精子取出在体外受精，培养发育成早期胚胎，再植回母体子宫内发育出生的婴儿，也就是采用体外受惊联合胚胎移植技术培育的婴儿。

胚胎核移植：一种利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术。

愈伤组织：脱分化后的细胞经过细胞分裂，产生无组织结构、无明显极性的松散的细胞团。

胚状体：由外植体或愈伤组织产生的与正常受精卵发育成的胚相类似的胚状结构。

胞质体：除去细胞核后由质膜包裹的无核细胞。

细胞融合：指使用人工的方法使2个或2个以上的细胞合并形成1个细胞的技术。

对称融合：两个完整的细胞间的融合。

异核体：来自不同基因型的融合细胞。

不对称融合：用物理或化学方法使某亲本的核或细胞质失活再与另一完整的细胞进行融合。

体细胞杂交：指将不同来源的体细胞融合并使之分化再生、形成新品种的技术。

花药和花粉培养：指离体培养花药和花粉，使小孢子改变原有的配子体发育途径，转向孢子体发育途径，形成花粉胚或花粉愈伤组织，最后形成花粉植株，从中鉴定出单倍体植株并使之二倍化的技术。

植物细胞培养：在离体条件下，将分离的植物细胞继代培养增殖，获得大量细胞群体的技术。

动物细胞培养：模拟体内生理环境使分离的动物细胞在体外生存、增殖的技术。

细胞悬浮培养：将细胞接种于液体培养基中并保持良好的分散状态的培养方式。

细胞固定化培养：将游离的细胞包埋在支持物内部或表面进行培养的技术。

贴壁培养：指细胞贴附在一定的固相表面进行的培养。

原代培养：接种组织块直接长出单层细胞或将组织分散成单个细胞再进行培养，在首次传代前的培养成为原代培养。

传代培养：指将原代培养的细胞继续转接培养的过程。

原代细胞：有分裂但不旺盛，且多呈二倍体核型的细胞。

细胞系：由原代培养经传代培养纯化，获得的能在体外生存的细胞群体。

细胞株：指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法，有单细胞增殖形成的细胞群。

天然培养基：只要有血清、组织提取液、鸡胚汁等，营养价值高，成分复杂来源有限。

单克隆抗体：经过免疫哺乳类动物单一的B淋巴细胞，可以分泌单一性抗体，这种具有特异性的同质性的抗体为单抗。

转基因技术：通过人工方式将外源基因整合到生物体基因组内，并使该转基因生物能稳定地将此基因遗传给后代的技术。

转基因生物反应器：将外源基因转入细胞或动植物，利用细胞增殖或动植物代谢制备外源基因的表达产物的技术。

乳腺生物反应器：将外源基因置于乳腺特异性调节序列指下，使之在乳腺中表达，然后通过回收乳汁获得有重要价值的生物活性蛋白的技术。

转基因克隆动物：通过核移植产生的转基因动物。

转基因动物：指在基因组内稳定地整合外源基因，并且外源基因可以稳定地遗传给后代的基因工程动物。

转基因植物：指将外源基因转入到植物的细胞或组织获得了新的遗传性状的植物。

转基因植物转化方法：载体介导法、基因直接导入法、种质系统法、病毒感染法。

干细胞：一类具有自我更新和分化潜能的细胞。分为胚胎干细胞和成体干细胞。

胚胎干细胞（ES细胞）：从着床前胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外分化抑制培养分离的一种全能性细胞，是可以分化成任何一种组织类型的细胞。

成体干细胞：是成体组织内具有进一步分化潜能的细胞，是多能或单能干细胞。

单能干细胞：只能分化为单一类型细胞的干细胞。如表皮的基质细胞只能分化产生表皮细胞。

多能干细胞：能够形成两种或两种以上类型细胞的干细胞。如骨髓造血干细胞可以分化成红细胞、巨噬细胞、粒细胞、巨核细胞、淋巴细胞等多种类型细胞。

全能干细胞：具有无限分化潜能的干细胞。如胚胎干细胞。

细胞重组：是指从活细胞中分离出细胞器及其组分，在体外进行重组装配成为具有生物活性的细胞的一种技术。

胞质杂种：将两种来源不同的核外遗传物质（细胞器）与一个特定的核组合在一起得到的细胞是胞质杂种。

同核体：基因型相同的细胞融合成的细胞。

异核体：来自不同基因型的融合细胞。

胚乳培养：指处于细胞期的胚乳组织的离体培养。胚乳是独特的组织，它的功能是为胚发育和种子萌发提供营养。

胚珠培养：指未受精或受精后的胚珠离体培养。未受精胚珠培养可为；离体受精提供雌配子体，也可诱发大孢子发育成单倍体植株。

细胞工程发展史：

1839年，施莱登和施旺发现了细胞学。

1902年，Haber labdt提出了细胞全能学说。

1958年，Stwovrd有胡萝卜韧皮部组织诱导生成再生植株。

1907年，Harrison创立动植物的组织培养技术。

细胞核移植：一种利用现为操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术。

细胞核移植事件：

1997年，英格兰爱丁堡罗斯林研究所和PPL制药公司利用高度分化的绵羊乳腺上皮细胞，通过核移植克隆了一只雌性小绵羊——多莉

植物原生质体融合有关事件：

1960年，科金应用酶解法首次成功的从番茄幼苗根部制备出大量原生质体。

1972年，卡尔森用NaNO3做诱导剂将来自不同种的两个烟草原生质体进行融合，得到一个体细胞杂种植株。

体细胞杂交：将不同来源的体细胞融合并使之分化再生形成新品种的技术。

体细胞杂交相关事件：

1972年，卡尔森开发出第一个体细胞杂种植物

1978年，米歇尔斯首次将番茄与马铃薯细胞杂交成功。

动物细胞培养：模拟体内生理环境使分离的动物细胞在体外生存，增值的一门技术。

动物细胞培养相关事件：

1907年，哈里森开创了动物组织培养的先河

1923年，卡雷尔设计的卡氏培养瓶，用于培养基胚的心肌组织取得成功，机打推动了动物细胞培养技术的建立。

1951年，厄尔利等人开发了动物细胞体外培养的培养基。

发展历史：

19世纪30年代，施莱登和施旺创立了细胞学说。

1902年，哈波兰德提出人工培育植物。

1934年，怀特配置出了植物组织培养用的培养基，发现了维生素和植物激素在植物组织培养中的重要作用。

1943年，怀特正式提出植物细胞具有全能性的学说。

1948年，催缴和斯库格发现腺嘌呤和生长素的比例是控制芽和根形成的主要条件之一。

1953年，缪尔开创了单细胞无性繁殖的工作。

1956年，米勒发现了有高度活力的促进细胞分裂和芽形成的物质命名为激动素。

1958年，史都华德首次通过实验证实了细胞具有全能性。

1960年，莫雷尔采用兰属的茎尖培养，实现了去病毒和快速繁殖两个目的。

转基因技术：通过人工方式将外源g整合到生物体g组内，并使该g生物能稳定地将此g遗传给后代的技术。

绪论：细胞工程的地位，内容和技术

从某种意义上来说，基因工程是现在生物技术的核心，而细胞工程则是它的基础和公共平台，基因工程与细胞工程的结合决定着生物技术的发展

按照生物类型可以分为：动物细胞工程，植物细胞工程，微生物细胞工程，按照操作对象可以分为细胞与植物培养，细胞融合，细胞核移植，染色体操作，转基因生物等，

2-5，常用的化学消毒方法有哪些？

化学方法（75%的酒精，甲醛，环氧乙烷，氯已定，戊二醛，过氧乙酸，等）

4-1 体培养细胞有哪些类型？其生长有什么区别？

一；贴壁型细胞

1 成纤维型细胞：细胞贴壁后呈长梭形，圆形细胞核位于中央，生长呈放射状，旋涡状走向。细胞之间排列疏散，有较大的细胞间隙。

2 上皮型细胞：细胞贴壁后呈三角形及不规则扁平的多角形，中央有扁圆形核，细胞彼次紧密连接。

3 游走型细胞：细胞在支持物上分散生长，一般不连接成片形成菌落，呈活跃的游走和变形运动，速度快且方向不固定，外形不规则且不断变化。

4 多形型细胞：形态上不规则，一般分胞体和胞突两部分，其中胞突为细长型，类似丝状伪足，胞体呈现多角形。

二：悬浮型细胞：某些细胞体外培养不需要贴附支持物上而生存空间大，能大量繁殖细胞，容易进行传代培养。

4-2细胞系的生长过程包括哪些？每一个生长阶段有什么特征？

（1）原代培养期：也称初代培养，是指从体内取出组织接种培养到第一代的阶段，一般持续1～4周。此期细胞移动比较的活跃，可见细胞分裂，但是不旺盛。

（2）传代期：原代细胞生长一定时间后，如是贴附型细胞就会连接成片而铺满瓶底，这时需要将原代细胞分开至多个培养瓶中。细胞增殖旺盛，并维持二倍体核型。

（3）衰退期：此期细胞仍生存，但是不增殖或者增殖很慢，最后衰退死亡。

4-3 每代细胞的生长曲线包括那几个主要时期？各期细胞有何特点？

（1）潜伏期：此时细胞已存活具有代谢及运动功能，但是尚未增殖（2）指数生长期：又称对数期，此期细胞增殖旺盛，成倍增长，活力最佳，适用于进行实验研究。（3）停止期，又称平台期，此期细胞几经将其支持物表面沾满，细胞活力减退，已不再进行分裂增殖。

4-4体外培养的细胞应满足哪些营养成分？

（1）水（2）平衡盐溶液（3）消化液（4）消化酶抑制液（5）PH 调整液：NaHCO3溶液，HEPES溶液，（6）抗生素液（7）谷氨酰胺补充液

4-5 什么是细胞系，细胞株？如何建立细胞系？在研究中细胞系和细胞株能发挥哪些作用？国际上有哪些著名的细胞库？

细胞系：是由原代培养经初步纯化，获得的一种细胞为主的，能在体外长期生存的不均一的细胞群体。

细胞株：细胞系经过进一步的克隆化，便得到由单一细胞组成的细胞株。

初代培养，又称为原代培养，即直接从体内取出的细胞，组织和器官进行第一次的培养物。一旦进行传代培养的细胞，便不再称为初代培养，而改称为细胞系