五、分析与计算

　　1、当谷氨酸C3上标记C14，氨基标记15N，在肝脏中氧化降解，同位素将出现在下列代谢物的哪个原子上，（1），琥珀酸，（2），天冬氨酸，（3），精氨酸，（4），****素

　　2、今有以下四种蛋白质的混合物1）分子量为15，000，pI=10；（2），分子量为62，000，pI=4；（3），分子量为28，000，pI=8；　（4），分子量为9，000，pI=6；若不考虑其它因素，当（A）用CM-纤维素层柱分离时，（B）用Sephadex　G50凝胶层析柱分离时，试写出这些蛋白的洗脱顺序

　　3、在以下修饰碱基中，何者在形成双链时氢键结合的性质不同于和它相关的普通碱基（1）2-甲基腺嘌呤（2）5-甲基胞嘧啶（3）5-羟甲基胞嘧啶（4）1-甲基鸟嘌呤

　　4、假定下面的DNA双链分子是从右向左进行转录，写出RNA转录产物的序列

　　5、________ATTCGCTTAAGCAA________3

　　3、________TAAGCGAATTCGTT________5

　　5、某酶制剂的比活力为42单位/mg蛋白质，每ml含12mg蛋白质，（1）计算1ml反应液中含5μl酶制剂时的反应初速度（2）若1ml反应液内含5μl酶制剂，在10分钟内消耗底物多少？为保证测定酶的初速度，所需要的最低底物浓度是多少？

　　6、有一酶分子使其变性后，用溴化氰降解，在降解产物种得到一个未知氨基酸顺序的九肽，试根据以下实验结果，推断出此九肽的氨基酸顺序

　　（1）氨基酸分析表明，它含有Ala，Arg，Cys，Glu，Lys，Met，Pro，Phe，

　　（2）用Edman法降解得到一个Pro的衍生物

　　（3）用胰蛋白酶水解得到一个游离Arg，一个二肽和一个六肽，此六肽在PH6、4时呈电中性状态

　　（4）用胰凝乳蛋白酶降解得到一个二肽，一个三肽和一个四肽A、二肽在PH6、4时呈负电荷

　　B、分析三肽发现里面含有硫

　　C、在PH6.4时分析四肽，静电荷为+2，在280nm分析表明不含有芳香氨基酸六。第一题非生化专业，第二题生化专业。

　　六、实验设计

　　（一）如何判明DNA制剂的纯度和是否为天然双链分子

　　1、如果细菌环状染色体的复制是双向的，并且从固定的复制起点开始，每个复制叉以16um/min的速度移动，细菌染色体长1280um，完成整个染色体复制所需的时间是多少？当细菌在营养丰富的培养基中每20分钟分裂一次，也就是说第一轮复制尚未完成就开始第二轮复制，此时染色体有几个复制叉？

　　（二）

　　1、利用标记的16SrRNA和未标记的细菌DNA进行分子表明，在饱和时100ugDNA能结合0、071ug的16SrRNA（分子量为5、3x105），该细菌Cell含有2、6x105道儿顿DNA、试计算每个细菌基因组所含16SrRNA基因的拷贝数。

　　2、用琼脂糖凝胶电泳分离制备质粒，分出三条带。请设计实验，判断何者是开环DNA，何者为线形DNA，何者为闭环环DNA